Белок Бенс-Джонса в моче, скрининг с применением иммунофиксации: описание, интерпретация результата, референсные значение

Для чего используется

Содержание

подозрение на множественную миелому, амилоидоз почек (целесообразно назначать в комплексе с электрофорезом и иммунофиксацией белков сыворотки крови, а также измерением концентрации основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови); пациенты, у которых высока вероятность множественной миеломы, при отрицательном результате электрофореза сыворотки крови; контроль терапии при болезни легких цепей.

Наименование метода

Электрофорез и иммунофиксация

Тип биоматериала/Тип пробирки/Цвет крышки

1) Тип биоматериала: МОЧА СУТОЧНАЯ
Тип пробирки, цвет крышки: Контейнер | Пробирка для мочи

Необходимый объем биоматериала

20-50 мл

Методы определения белка Бенс Джонса в моче и интерпретация результата

Существует несколько способов исследования. Качественный способ позволяет определить наличие или отсутствие белка. Количественное определение используется для установления стадии заболевания, оценки динамики процесса и наличия ответа на терапию, прогноза для выздоровления.

Качественный метод:

Качественный способ очень прост. Фильтрат мочи нагревается до 60 градусов, при этом на стенках пробирки образуется характерный осадок, растворяющийся при дальнейшем повышении температуры.

Количественные методы определения белка Бенс Джонса в моче:

  • Метод электрофореза с иммунофиксацией. Чувствительный. Точный. Суть методики: Электрофорезом делят белки на фракции, парапротеин фиксируют иммунной сывороткой, выявляют с помощью специального окрашивания.
  • Реакция преципитации с сульфоновой кислотой: Фильтрат мочи смешивается с сульфосалициловой кислотой, нагревается до определённой температуры. В выпавшем осадке определяется количество парапротеина.

В анализе здорового человека парапротеина быть не должно. Наличие белка Бенс Джонса указывает на необходимость, в первую очередь, исключить миелому. Пациенту назначаются дополнительные методы обследования.

Следует помнить: Системные заболевания соединительной ткани и некоторые типы опухолей могут дать ложноположительную реакцию.

Преаналитические требования

Подготовка к исследованию:

После туалета наружных половых органов среднюю порцию мочи собирают в предоставленный контейнер. Контейнер в обязательном порядке маркируется: указываются Ф.И.О. пациента, номер образца, кодовый номер учреждения-заказчика (данные должны соответствовать данным, указанным в направительном бланке). Сбор мочи необходимо производить обязательно до различных эндоуретральных и эндовезикальных исследований и процедур. После проведения цистоскопии анализ мочи можно назначать не ранее 5-7 сут..

Условия хранения и транспортировки:

Хранить контейнеры с мочой при температуре +2…+8°С. Доставить в лабораторию в день взятия биоматериала.

Подготовка к исследованию и сбор мочи

Подготовка к исследованию:

  • Доверительная беседа врача с пациентом, разъясняющая цель исследования, необходимость подготовки.
  • Прекращение употрeбления алкоголя и, по возможности, диуретиков за 1-2 суток до сбора мочи.
  • Женщинам проводить исследование в отсутствие мeнcтpуации.

Сбор мочи:

Выполняется туалет наружных мочепoлoвых органов. Производится сбор средней порции в специальную пластиковую ёмкость или чистую стеклянную посуду с крышкой. Доставляют в лабораторию в течение 2-3 часов.

Для отслеживания динамики патологического процесса или дифференциальной диагностики может назначаться исследование суточной мочи. Биоматериал собирается при каждом мочеиспускании в течение 24 часов, начинается с первой утренней порции и заканчивается утром следующего дня. Хранится в холодильнике. По окончании сбора немедленно доставляется в медицинское учреждение.

Анализ на наличие белка Бенс-Джонса в моче: что показывает, зачем делается, методика проведения

Клинический анализ мочи (или общий анализ мочи) – часто применяющийся метод лабораторной диагностики, позволяющий оценить состояние здоровья человека.

Белок Бенс-Джонса (или протеин Бенс-Джонса, Bence Jones protein) в моче должен отсутствовать, а его обнаружение является сигналом развития определенных заболеваний, в том числе онкологических.

Стабильность аналитов

сохраняет стабильность при температуре минус 17°С…-23°С

Показания к назначению

Анализ назначается для исключения:

  • Множественной миеломы, солитарной плазмоцитомы.
  • Наследственного первичного системного амилоидоза.
  • Моноклональной гаммапатии.
  • Макроглобулинемии Вальденстрема.

Подозрение на множественную миелому является самым частым и основным показанием для назначения исследования. Заболевание проявляется болями в позвоночнике, других костях, обусловленными разрушением костной ткани и патологическими переломами.

Появляются характерные лабораторные изменения в анализах крови. Приблизительно у 20% пациентов выявляются лёгкие цепи при исследовании мочи.

Первичный амилоидоз часто сопутствует миеломной болезни, но может являться самостоятельным заболеванием. Плазматические клетки выpaбатывают огромное количество белка – амилоида, который откладывается в органах и тканях, вызывая необратимые изменения. Чаще других органов страдают почки. В моче определяется белок Бенс Джонса.

Макроглобулинемия Вальденстрема – злокачественное поражение костного мозга, характеризующееся синдромом избыточной вязкости крови. Большого диагностического значения наличие парапротеина не имеет. Однако при исследовании определяется небольшое его количество.

Моноклональные гаммапатии сами по себе не являются злокачественными. Клинически такие состояния себя ничем не проявляют.

При длительном существовании могут трaнcформироваться в миелому или макроглобулинемию Вальденстрема.

Существует мнение, что такая трaнcформация происходит обязательно через 10 40 лет, но учитывая возраст пациентов (патология выявляется у лиц, старше сорокалетнего возраста), не успевает развиться.

Боли во время мочеиспускания после родов

Пациенты с моноклональной гаммапатией подлежат регулярному наблюдению, в том числе исследованию мочи на наличие лёгких цепей.

Основные синдромы, при которых показан анализ:

  • Болевой синдром: интенсивные боли в костях, позвоночнике, не снимающиеся нестероидными противовоспалительными средствами, плохо поддающиеся лечению.
  • Геморрагический синдром: подкожные кровоизлияния от мелкоточечной петехиальной сыпи до крупных синяков, повышенная кровоточивость дёсен, носовые и другие кровотечения.
  • Гиперпластический синдром: увеличение печени, селезёнки, лимфатических узлов.
  • Амилоидные поражения органов и тканей.

Дополнительные признаки:

  • Симптомы интоксикации: общее недомогание, слабость, потливость, повышение температуры тела от субфебрильной до высокой.
  • Лабораторные изменения: стойкое снижение уровня эритроцитов, тромбоцитов, гемоглобина, ускорение СОЭ в общем анализе крови.Повышение общего белка при биохимическом исследовании крови, наличие М-протеина.

Важно: кроме диагностики и дифференциальной диагностики, исследование проводится для оценки ответа на терапию и прогноза течения заболевания.

Причины появления белка Бенс-Джонса в моче

Протеинурия – это наличие более 0,033 г/л протеина в моче. Она может быть вызвана либо заболеванием почек, либо появлением в крови патологических протеинов.

У здорового человека белковые молекулы не проходят через почечный фильтр из крови в урину. Протеинурия появляется в таких случаях:

  • нарушение работы почечных клубочков (гломерул), в которых фильтруется кровь;
  • наличие в крови неправильных протеинов, которые не задерживаются гломерулами;
  • инфекционные заболевания мочевыводящих путей и кaнaльцев почки;
  • опухолевые заболевания почки или мочевыводящих путей;
  • развитие почечной недостаточности.

Белок Бенс-Джонса в моче появляется по первому или второму механизму. Основная причина — миеломная болезнь.

Это онкологическое заболевание крови, при котором плазматические клетки иммунной системы вместо обычных антител создают парапротеины – аномальные иммуноглобулины.

Кроме миеломы, появление в крови парапротеинов характерно для макроглобулинемии Вальденстрема и болезни тяжелых цепей.

Здоровые плазматические клетки, или B-лимфоциты, создают антитела (иммуноглобулины) для уничтожения чужеродных белков.

Атипичные (то есть опухолевые) плазмоциты часто синтезируют патологические протеины, ненужные организму человека из-за их неспособности бороться с инфекциями. Такие белковые молекулы могут выводиться из крови почками.

Множество других болезней может проявляться появлением патологического белка в крови и моче. К таким заболеваниям относятся:

  • различные лимфомы (опухоли лимфатической системы — лимфоузлов, селезенки);
  • различные лейкозы, они же лейкемии, — злокачественные заболевания крови и костного мозга;
  • амилоидоз (синтез и отложение в органах дефектного белка — амилоида);
  • раковые опухоли печени;
  • остеосаркомы (злокачественные опухоли костной ткани).

Обнаружение в урине патологического белка может быть следствием ошибки. Даже современные высокотехнологичные методы исследования имеют погрешность.

Важно, чтобы постановкой диагноза занимался врач, который сможет оценить результаты не только одного метода исследования. Любой диагноз должен ставиться на основе совокупности симптомов и заключений после нескольких обследований.

Белок Бенс Джонса в моче: что это, показания и проведение исследования

Иногда, при целенаправленном исследовании мочи, определяется белок Бенс Джонса, являющийся маркёром грозных заболеваний.

Чтобы понять, какое значение имеет это вещество, необходимо иметь общее представление об иммунитете. Иммунная система представлена группой клеток выявляющих, захватывающих и уничтожающих таких патологических агентов, как бактерии, вирусы, клетки злокачественных новообразований.

Для обеспечения этих функций синтезируются антитела – иммуноглобулины. При опухолях костного мозга продукция иммуноглобулинов нарушается, в организм с током крови поступает избыточное количество их фрагментов. Белок Бенс Джонса является фрагментом иммуноглобулина цепью аминокислот.

Другие названия парапротеин, лёгкие цепи или L-цепи. Лёгкие цепи выводятся почками. Являясь патологическим веществом, парапротеин нарушает функцию почечных кaнaльцев и приводит к развитию хронической почечной недостаточности.

Когда назначается

Определение причины клинической симптоматики, включая боли в спине, спонтанные переломы, частые бактериальные инфекции, полиневрит, гемолитическую анемию, нефротический синдром, кожную пурпуру, синдром повышенного СОЭ, гиперкальциемию, амилоидоз внутренних органов, эндокринопатию и органомегалию. Оценка нарушения функции почек при парапротеинемиях.

Клиническая информация о тесте

Белок Бенс-Джонса используется в качестве диагностического теста множественной миеломы (опухоли плазматических клеток). Структура белка Бенс-Джонса представлена полимерами с молекулярной массой 22-24 кДа, состоящими из свободных легких цепей иммуноглобулинов. У здоровых людей небольшое количество свободных легких цепей продуцируется постоянно, наряду с полными молекулами иммуноглобулинов. В связи с небольшой молекулярной массой и нейтральным зарядом они фильтруются в первичную мочу через базальную мембрану клубочка, затем реабсорбируются и подвергаются метаболизму в проксимальных канальцах, не попадая в конечную мочу.

При моноклональных гаммапатиях, прежде всего, при множественной миеломе, идиопатическом первичном амилоидозе, реже – при макроглобулинемии Вальденстрема, наблюдается значительная продукция аномальных иммуноглобулинов злокачественным клоном плазматических клеток. Это приводит к избытку свободных легких цепей в первичной моче и появлению белка Бенс-Джонса в конечной моче.

Выявление белка Бенс-Джонса

Современные методы определения белка Бенс-Джонса в моче требуют использования нескольких сложных технологий. В начале исследования из биологического материала выделяется весь белок.

Методом электрофореза общий протеин разделяется на фракции в зависимости от массы молекулы. Специальными растворами сывороток обpaбатывают нужную фракцию протеина.

Реакция иммуноглобулина (антитело в крови человека) с сывороточным раствором (набором антигенов) вызывает образование иммунного комплекса.

Такое соединение становится явно заметным после специального окрашивания. Наборы антител дорогие, но достаточно точно выявляют нужный протеин.

Раньше использовался другой, менее надежный метод. Цельная моча нагревалась минимум до 60 градусов Цельсия (не более 80), затем охлаждалась до 2-8 °С, и нагревалась повторно практически до кипения.

При этом протеины, растворенные в моче, выпадали в осадок сразу.

Белок Бенс-Джонса сворачивался при температуре мочи 50-60 градусов, выпадал в осадок при охлаждении, а затем снова растворялся при нагревании до температуры кипения.

Такие изменения при температурном воздействии позволяли отличить его от других белковых соединений в урине.

Разновидности миеломной болезни по типу выявляенных парапротеинов

По виду синтезируемых парапротеинов (иммуноглобулинов и их фрагментов) выделяют несколько разновидностей миеломной болезни. Чаще встречается G-миелома (в 50% случаев миеломы), когда в крови обнаруживается парапротеин, представленный иммуноглобулином класса G (IgG). Белок Бенс-Джонса (каппа и лямбда цепи) определяются в 20% при миеломе. А-миелома, когда выявляется парапротеин, представленный иммуноглобулином класса А( IgA), обнаруживается в 20% случаев. Выделяют также М-миелому, представленную иммуноглобулином класса IgM. Встречается несекретирующая миелома, при которой синтеза парапротеинов не происходит.

Интерпретация результатов

Результат сопровождается комментариями по интерпретации. Референсные значения: белка Бенс-Джонса не обнаружено. Интерпретация Наличие белка Бенс-Джонса указывает на серьезное гемато-онкологическое заболевание, он является маркером, характерным для множественной миеломы и родственных заболеваний группы плазмоклеточных дискразий. Выявление белка Бенс-Джонса указывает на высокий риск поражения органов-мишеней, включая миеломное поражение почек с формированием почечной недостаточности, значительных литических изменений костей и анемии.

Белок Бенс-Джонса отмечается в 2/3 всех случаев множественной миеломы, но обычно не выявляется при доброкачественной парапротеинемии. При обнаружении его в моче необходима консультация врача-гематолога и углубленное обследование для исключения онкогематологических заболеваний. Результат определения белка Бенс-Джонса может быть ложноположительным в случае редких аутоиммунных процессов, сопровождающихся выраженной иммунной активацией, например, при СКВ или ревматоидном артрите.

Как сдавать анализ мочи на белок Бенс-Джонса

Анализ мочи на белок Бенс-Джонса — непростое исследование. Анализ мочи на белок Бенс-Джонса включает ряд сложных манипуляций, поэтому лаборантам нужен правильно собранный образец.

Общие правила сбора урины для определения протеина Бенс-Джонса:

  • за неделю до сдачи анализа уменьшить употрeбление печени и мяса;
  • за день до сдачи исключить газированную воду и напитки, спиртное, яркие овощи и фрукты в свежем виде, иногда врач порекомендует отменить прием некоторых лекарств;
  • заранее подготовить контейнер для сбора мочи. Это может быть аптечная одноразовая емкость, не нуждающаяся в обработке или стеклянная баночка с металлической крышкой после промывания кипятком;
  • перед сбором мочи вымыть пoлoвые органы без мыла и моющих средств;
  • собрать среднюю порцию утренней мочи объемом не менее 50 мл (при первом мочеиспускании после пробуждения первую порцию мочи нужно слить в унитаз, затем основную порцию собрать в емкость, и закончить мочеиспускание не в банку);
  • герметично закрыть контейнер и в течение максимум двух часов доставить его в лабораторию (время можно продлить, если собранную урину охладить).
230 Просмотров
Советы и рекомендации
Добавить комментарий




Содержание информации на сайте носит только информационный и ознакомительный характер, который помогает у посетителей сформировать мнение о профилактике, симптомах и методах лечения почек.

Наверх